呼吸道九聯(lián)檢一般采用間接免疫熒光法，通過熒光素標(biāo)記的抗人球蛋白與抗原抗體復(fù)合物反應(yīng)，用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。

免疫熒光顯微鏡檢測(cè)呼吸道九聯(lián)檢要用幾組熒光？

在呼吸道九聯(lián)檢的熒光檢測(cè)中，熒光信號(hào)的激發(fā)與識(shí)別依賴特定波長(zhǎng)的光波段，核心圍繞“激發(fā)光（讓熒光素發(fā)光的光）"和“發(fā)射光（熒光素實(shí)際發(fā)出的光）"兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，具體波段選擇與檢測(cè)中使用的熒光素種類直接綁定（臨床常用的是異硫氰酸熒光素FITC）。

正置三色熒光模塊匹配奧林巴斯BX53顯微鏡應(yīng)用于廣州某三甲醫(yī)院呼吸道病毒檢測(cè)

用藍(lán)光激發(fā)FITC熒光素→熒光素釋放綠光（陽性信號(hào)），同時(shí)背景染料釋放紅光→顯微鏡通過濾片組篩選出這兩種光，最終呈現(xiàn)“綠信號(hào)（病原體陽性）+紅背景（陰性區(qū)域）"的清晰視野，波段無重疊，不會(huì)干擾陽性信號(hào)的識(shí)別，醫(yī)生能通過“紅光背景中的綠光斑點(diǎn)"快速定位陽性區(qū)域。

激發(fā)光 465-495nm（藍(lán)光） 熒光素（FITC）需要吸收特定能量的光才能“被激活"，465-495nm的藍(lán)光恰好能提供其所需能量，促使FITC的電子從“基態(tài)"躍遷到“激發(fā)態(tài)"。

發(fā)射光 515-535nm（綠光） 激發(fā)態(tài)的電子不穩(wěn)定，會(huì)快速回到基態(tài)并釋放能量，能量以“光"的形式釋放，即發(fā)出515-535nm的綠光，這也是顯微鏡下觀察到的“陽性信號(hào)色"。

背景染料的波段：紅色信號(hào)用于定位與對(duì)比

為了避免“熒光信號(hào)淹沒在背景中"，試劑盒會(huì)添加紅色背景染料（如碘化丙啶PI、EvansBlue），其作用是給“非目標(biāo)區(qū)域"（如細(xì)胞、載玻片背景）染色，形成“綠信號(hào)（陽性）+紅背景（陰性）"的清晰對(duì)比。

很多用戶選擇在已有的生物顯微鏡升級(jí)改造為熒光顯微鏡，利用LED熒光模塊將普通生物顯微鏡改造為適用于呼吸道九聯(lián)檢的熒光顯微鏡，是臨床檢測(cè)中低成本、高效的方案。選擇升級(jí)LED熒光模塊，主要是因?yàn)槠渚哂袩晒庑Ч?、操作?jiǎn)便、使用壽命長(zhǎng)、成本效益高等優(yōu)勢(shì)，能夠有效提升醫(yī)院的檢測(cè)水平和工作效率。

廣州明慧提供LED熒光模塊升級(jí)熒光顯微鏡，替代傳統(tǒng)激發(fā)光源，具備穩(wěn)定、低發(fā)熱、壽命長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)，傳統(tǒng)汞燈需預(yù)熱且壽命短，LED更適合臨床高頻使用，該方案成本僅為專業(yè)熒光顯微鏡的1/5-1/3，且操作便捷、維護(hù)成本低，特別適合醫(yī)院或應(yīng)急檢測(cè)場(chǎng)景的快速部署免疫熒光顯微鏡檢測(cè)呼吸道九聯(lián)檢。